目前ELISA法仍在研究当中占有着主流地位,
鱼ELISA试剂盒的普遍应用使得实验更加方便、经济和准确,ELISPOT技术的优点也决定了它的发展潜力。LISPOT法来源于ELISA,相比较传统的ELISA法有所突破,是定量ELISA技术的延伸和发展。由于游离的循环抗体或CK的半哀期不同,使之在体液中不断的被代谢或与靶器官结合,传统的酶联免疫吸附法(ELISA法)不能确切的反映体内的抗体及CK的水平。80年代,国外的科研工作者根据ELISA技术的基本原理,建立了体外检测特异性抗体分泌细胞和CK分泌细胞的固相酶联免疫斑点技术(ELISPOT)。
鱼ELISA试剂盒的操作使用说明:
1、标准品
(1)从试剂盒中取出一支标准品,于6000-10000rpm离心30秒。用1ml样本稀释液溶解,并用吸头对准冻存管底部反复吸打5次以助溶解,充分混匀得到标准品S7,放置备用。
(2)取7个1.5ml离心管(S0-S6)依次排列,各加入250μl样本稀释液。吸取250μl标准品S7到*个离心管中(S6),轻轻吹打混匀。从S6中吸取250μl到第二个EP管中(S5),轻轻吹打混匀。以此类推进行标准品的倍比稀释。S0为样本稀释液。
2、洗液工作液
浓洗涤液按1:25倍用去离子水进行稀释。例如用量筒量取240ml去离子水,倒入烧杯或其他洁净容器中,再量取10ml浓洗涤液,均匀加入,搅拌混匀,在临用前配妥。浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
3、标记抗体工作液
标记抗体液按1:100倍用标记抗体稀释液进行稀释。如10μl标记抗体加990μl标记抗体稀释液,轻轻混匀,在临用*分钟内配妥。
4、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液
辣根过氧化物酶标记亲和素按1:100倍用辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液进行稀释。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液,轻轻混匀
以上就是鱼ELISA试剂盒的操作使用说明