热门搜索: 硫酸角质素(KS)ELISA试剂盒(种属:鱼) 白介素6(IL6)ELISA试剂盒(种属:鱼) 鱼白介素10(IL10)ELISA试剂盒发货及时 斑马鱼白介素12BELISA试剂盒发货及时 兔载脂蛋白B(apo-B)ELISA试剂盒发货及时 cg星空游戏解说 兔羟脯氨酸(Hyp)ELISA试剂盒发货及时 兔抗酒石酸酸性磷酸酶ELISA试剂盒发货及时 兔晶体蛋白α(Cryα)ELISA试剂盒发货及时 兔结缔组织生长因子ELISA试剂盒发货及时 兔基质金属蛋白酶9ELISA试剂盒发货及时 cg手游星空游戏 cg星空游戏免费 cg星空游戏 阻抑素(PHB)ELISA试剂盒(种属:大鼠) 中性内肽酶;脑啡ELISA试剂盒(种属:大鼠)

技术文章/ Technical Articles

您的位置:首页  /  技术文章  /  单宁含量检测试剂盒说明书

单宁含量检测试剂盒说明书

更新时间:2023-07-06      浏览次数:814

规格:100T/96S

产品内容:

提取液:液体100mL×2瓶,4℃保存。试剂一:粉剂×1瓶,常温保存。


 

 

微量法


标准品:粉剂×1支,10mg单宁酸,4℃保存。临用前加入1.175mL提取液溶解为5000nmol/mL的标准液。

产品说明:

单宁又称植物多酚,是一类广泛存在于植物体内的多元酚化合物。单宁可作为潜在的生物标记物;与蛋白质结合的能力又称为收敛性或涩性。其收敛性是多种生理活性的基础,如止血、抗肿瘤、抗衰老等生理活性,也是影响产品口感的因素之一。

根据光谱特性,单宁在275nm下有较强的紫外吸收,通过利用活性炭能够特异吸附单宁的性质来检测单宁含量。

自备实验用品及仪器:

紫外分光光度计/酶标仪、离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96UV板和蒸馏水。

测定操作:

1、样本处理:

将样本烘干至恒重,粉碎,过40目筛之后,称取约0.05g,加入1mL提取液,封口膜封口防止液体溅出,于70℃水浴提取30min,期间可摇晃数次。12000rpm,25℃,离心10min,取上清,用提取液定容至1mL,待测。

2、操作步骤:

1)紫外分光光度计/酶标仪预热30min,波长调至275nm。蒸馏水调零。

25000nmol/mL标准液用提取液稀释为6.253.1251.56250.786250.40.2nmol/mL标准溶液。

3)加样表:

试剂名称

测定管

对照管

标准管

空白管

试剂一

大约5-7mg

-

-

大约5-7mg

蒸馏水

-

-

-

0.5mL


标准溶液

-

-

0.5mL

-

样品

0.5mL

0.5mL

-

-

充分混匀震荡5min13000g 离心20min。取200µL上清液测定275nm下的吸光度,分别记为A测定管、A对照管、A标准管、A空白管,计算∆A测定=A对照管-A测定管,A标准=A标准管-A空白管。

单宁含量计算:

1、标准曲线的绘制:

以标准溶液的浓度为x轴,以A标准为y轴,绘制标准曲线,得到方程y=kx+b,将∆A测定带入方程中得到xnmol/mL

2、单宁含量计算:

1. 按蛋白浓度计算:

单宁含量(nmol/mg prot=x×V提取÷(V提取×Cpr) =x÷Cpr

2. 按样本鲜重计算:

  nmol/g =x×V   ÷W =x÷W Cpr 样品蛋白浓度,mg/mL(蛋白浓度需重新用PBS提取测定);W:样品质量,gV提取:

提取液体积,2mL

注意事项:

1 ∆A大于1.5时,建议将样品上清液用提取液稀释更大倍数后测量;∆A过小时,建议减少稀释倍数或增加样品质量来测定。


微信扫一扫

邮箱:2450868877@qq.com

传真:86-区号-传真号码

地址:上海市杨浦区铁岭路32号1519-10室

Copyright © 2024 上海仁捷生物科技有限公司版权所有   备案号:沪ICP备16052159号-1   总访问量:259316   技术支持:化工仪器网

TEL:17302193538

扫码加微信
Baidu
map