ELISA试剂盒操作使用时实验室需留意这几点

更新时间：2022-01-24

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　　ELISA试剂盒检测原理：采用免疫荧光定量检测技术、免疫层析法。用于检测人体全血、血浆样本中D-二聚体的含量。将血液样本和样品缓冲液在缓冲液瓶中进行混合，缓冲液中的荧光标记抗D-二聚体抗体和血液中的D-二聚体抗原结合形成抗原抗体复合物。当混合物样本被加入到检测卡的加样孔后，在层析作用下沿着硝酸纤维素膜向前扩散，该复合物被固定在检测线上的D-二聚体抗体捕获，血液样本中的D-二聚体越多，检测线上聚集的复合物越多，荧光抗体的信号强度反映了被捕获的D-二聚体数量，通过干式免疫荧光定量分析仪处理，能够检测血液样本中D-二聚体的浓度。

　　ELISA试剂盒操作使用时实验室需留意这几点：

　　1. 固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其方法可所以凹孔平板、试管、珠粒等。现在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在运用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，调查其显色反应是否均一性，据此判明其吸附功能是否良好。

　　2. 酶符号抗体作业浓度的选择：首先用直接ELISA法进行开始效价的滴定。然后再固定其它条件或采纳“方阵法”在正式实验系统里准确地滴定其作业浓度。

　　3.酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应，而本身无色。有些供氢体有潜在的致癌作用，应留意防护。有条件者应运用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是现在较为满意的供氢体。ELISA试剂盒底物作用一段时间后，应参与强酸或强碱以停止反应。

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