果糖-1,6-二磷酸(FDP)测试盒实验科研
产品说明: 果糖 1,6-二磷酸(fructose-1,6-diphosphate, FDP)是糖酵解过程中的一种重要的中间产物,对多种酶具有调节 作用,具有改善细胞能量代谢、增加能量利用、抗心律失常及抗组织过氧化等作用,广泛应用于临床医药。
醛缩酶催化果糖 1,6-二磷酸裂解,产物与 2,4-二硝基苯肼在酸性介质中反应生成 2,4-二硝基苯腙,在碱性溶液 中呈红棕色,在 540 nm 处有特征吸收峰
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品: 可见分光光度计、低温台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰 和蒸馏水、EP管。
样本处理 1. 组织:按照质量(g):提取液一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液一)加入提取 液一,冰浴匀浆后于4℃,12000g离心10min,取0.8mL上清液,再加入0.16mL提取液二,4℃,12000g离心10min 后取上清待测。 2. 细胞:按照细胞数量(10 4个):提取液一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液 一)加入提取液一,冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);于4℃,12000g 离心10min,取0.8mL上清液,再加入0.16mL提取液二,4℃,12000g离心10min后取上清待测。 3. 血清(浆):取100μL血清(浆)加入1mL提取液一,4℃,12000g离心10min,取0.8mL上清液,再加入0.16mL提取液二,4℃,12000g离心10min后取上清待测。