产品说明: 谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px 或 GPX)是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解 酶。GPX 能够催化还原型谷胱甘肽(GSH)生成氧化型谷胱甘肽(GSSG),使有毒的过氧化氢还原成无毒的羟基 化合物。
GPX 催化 H2O2氧化 GSH,产生 GSSG,GSH 能与 DTNB 生成在 412nm 处有特征吸收峰的化合物,412nm 下吸 光度的下降即可反应 GPX 的活性。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、天平、台式离心机、微量玻璃比色皿/96 孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、EP 管。
样本处理
1、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取 0.05g 组织,加入 1mL 提取液)进行冰 浴匀浆。10000rpm,4℃离心 10min,取上清置冰上待测(如上清不清澈,再离心 3min)。
2、细菌、细胞:按照细胞数量 10 4个:提取液体积(mL)500~1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL 提取液), 冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3s,间隔 7s,总时间 3 min)然后 10000rpm,4℃,离心 10min,取上 清置冰上待测(如上清不清澈,再离心 3min)。
3、血清(浆)等液体:直接测定。