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更新时间:2018-02-27      浏览次数:1697

鱼皮质醇(COR)ELISA检测试剂盒灵敏度值实验室

鱼皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒

英文名称:Fish Cortisol ELISA Kit
实验类型:夹心法
检测范围:50 pg/mL – 1600 pg/mL
zui低检测限:10 pg/mL
应用范围:血清、血浆、组织匀浆、细胞培养物上清或其它相关液体(本产品仅供实验室科研及非临床用途)

实验原理:
将目标包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入品或标本,其中的目标连接于固相载体上的结合,然后加入微生物化的目标,将未结合的生物素洗净后,加入HRP标记和亲和素,再次*洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。

鱼皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒组成

试剂盒组成96孔配置48孔配置备注
微孔酶标板8孔×12条8孔×6条 无
标准品0.3mL×6管0.3mL×6管
样本稀释液6mL3mL
检测抗体-HRP10mL5mL
20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释
底物A6mL3mL
底物B6mL3mL
终止液6mL3mL
封板膜2张2张
说明书1份1份
自封袋1个1个
 

 

操作步骤

1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2. 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3. 样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5. 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

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